plasurВопросы реконструктивной и пластической хирургииIssues of Reconstructive and Plastic Surgery1814-1471АНО "НИИ микрохирургии"10.52581/1814-1471/81/03plasur-83Research ArticleЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ХИРУРГИЯEXPERIMENTAL SURGERYРегенеративное действие тканеинженерных конструкций на основе волокнисто-проницаемого никелида титанаRegenerative effect tissue engineering scaffold based on fibrous permeable TiNi-based alloyhttps://orcid.org/0000-0003-3690-0177КокоревО. В.KokorevO. V.

Кокорев Олег Викторович – д-р мед. наук, вед. научн. сотрудник лаборатории сверхэластичных биоинтерфейсов, лаборатории медицинских сплавов и имплантатов с памятью формы; доцент кафедры биохимии и молекулярной биологии с курсом клинической лабораторной диагностики

Россия, 634050, г. Томск, пр. Ленина, д. 36

Россия, 634050, г. Томск, ул. Московский тракт, д. 2

 

Oleg V. Kokorev, Dr. Med. sci., leading researcher, the Laboratory of Superelastic Interfaces, Laboratory of Medical Alloys and Shape Memory Implants; Associate Professor, the Department of Biochemistry and Molecular Biology with the Course of CLD

2, Moskovskiy tract st., 634050, Tomsk, Russia

kokorevov@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-7741-4987ДамбаевГ. Ц.DambayevG. Ts.

Дамбаев Георгий Цыренович – заслуженный деятель науки РФ, д-р мед. наук, профессор, член-корреспондент РАН, зав. кафедрой госпитальной хирургии с курсом сердечно-сосудистой хирургии

Россия, 634050, г. Томск, ул. Московский тракт, д. 2

Georgiy Ts. Dambayev, Honored Worker of Science of Russia, Dr. Med. sci., Professor, Corresponding member of RAS, head of the Department of Hospital Surgery with a Course of Cardiovascular Surgery

2, Moskovskiy tract st., 634050, Tomsk, Russia

dambaev@vtomske.ruhttps://orcid.org/0000-0003-4615-5270МарченкоЕ. С.MarchenkoE. S.

Марченко Екатерина Сергеевна – канд. физ.-мат. наук, зав. лабораторией сверхэластичных биоинтерфейсов,зав. кафедрой прочности и проектирования

Россия, 634050, г. Томск, пр. Ленина, д. 36

Ekaterina S. Marchenko, Cand. Phys.-Math. sci., head of the Laboratory of Superelastic Biointerfaces; head of the Department of Strength and Design of the FPT

36, Lenin Ave., Tomsk, 634050, Russia

89138641814@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-6963-2047ГюнтерС. В.GuntherS. V.

Гюнтер Сергей Викторович – канд. техн. наук, ст. научн. сотрудник лаборатории сверхэластичных биоинтерфейсов

Россия, 634050, г. Томск, пр. Ленина, д. 36

Sergey V. Gunther, Cand. Tech. sci., senior researcher, the Laboratory of Superelastic Biointerfaces

36, Lenin Ave., Tomsk, 634050, Russia

guntersv@inbox.ruhttps://orcid.org/0000-0001-6504-5232ЗайцевК. В.ZaitsevK. V.

Зайцев Константин Васильевич – канд. мед. наук, зав. лабораторией медицинских биотехнологий

Россия, 634009, г. Томск, ул. Розы Люксембург, д.2а

Konstantin V. Zaitsev, Cand. Med. sci., head of the Laboratory of Medical Biotechnology

2a, Roza Luxembourg st., Tomsk, 634009, Russia

zaitsev-kv@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-6081-1751КовалёваМ. А.KovalyovaM. A.

Ковалёва Марина Андреевна – научн. сотрудник лаборатории сверхэластичных биоинтерфейсов

Россия, 634050, г. Томск, пр. Ленина, д. 36)

Marina A. Kovalyova, Researcher, the Laboratory of Superelastic Biointerfaces

36, Lenin Ave., Tomsk, 634050, Russia

marina.kovalyova.16@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-6803-5934ГюнтерВ. Э.GuntherV. E.

Гюнтер Виктор Эдуардович – заслуженный деятель науки РФ, д-р техн. наук, профессор кафедры физики металлов физического факультета

Россия, г. Томск, пр. Ленина, д. 36

Victor E. Gunther, Honored Scientist of the Russia, Dr. Techn. sci., Professor, the Department of Physics of Metals, Physical Faculty

36, Lenin Ave., Tomsk, 634050, Russia

Национальный исследовательский Томский государственный университет; Сибирский государственный медицинский университетРоссияNational Research Tomsk State University; Siberian State Medical UniversityRussian FederationСибирский государственный медицинский университетРоссияSiberian State Medical UniversityRussian FederationНациональный исследовательский Томский государственный университетРоссияNational Research Tomsk State UniversityRussian FederationФедеральный научно-клинический центр медицинской реабилитации и курортологии Федерального медико-биологического агентства РоссииРоссияFederal Scientific and Clinical Center of Medical Rehabilitation and Balneology, Federal Medical and Biological Agency of RussiaRussian Federation2022250620222522537Copyright © Кокорев О.В., Дамбаев Г.Ц., Марченко Е.С., Гюнтер С.В., Зайцев К.В., Ковалёва М.А., Гюнтер В.Э., 20222022Кокорев О.В., Дамбаев Г.Ц., Марченко Е.С., Гюнтер С.В., Зайцев К.В., Ковалёва М.А., Гюнтер В.Э.Kokorev O.V., Dambayev G.T., Marchenko E.S., Gunther S.V., Zaitsev K.V., Kovalyova M.A., Gunther V.E.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://plasur.elpub.ru/jour/article/view/83

Целью исследования in vivo было изучение возможности применения интракорпоральных конструкций с гепатоцитами, культивируемыми на волокнисто-проницаемом матриксе из никелида титана (ВПМНТ). Мы стремились определить, превосходит ли применение гепатоцитов, культивированных в ВПМНТ, простую инъекцию гепатоцитов с точки зрения восстановления функций печени и времени выживания на модели крыс с CCl4-индуцированным гепатитом. В исследовании было использовано 200 животных следующих экспериментальных групп: I группа – контрольная; II группа – животные с токсическим гепатитом; III группа – животные с токсическим гепатитом с последующей имплантацией бесклеточных ВПМНТ (фиктивная хирургия); IV группа – животные с токсическим гепатитом с последующей инфузией только гепатоцитов (20 × 106 клеток / мл); V группа – животные с токсическим гепатитом с последующей имплантацией гепатоцитов, культивированных в ВПМНТ. На пяти животных с помощью сканирующей электронной микроскопии (СЭМ) проведен анализ эволюции гепатоцитов in vivo в ВПМНТ. В анализе СЭМ гепатоциты продемонстрировали хорошую адгезию и пролиферацию в поровом пространстве ВПМНТ. Более того, зрелая ткань, содержащая как коллоидные, так и волокнистые компоненты, заполнила поры матрикса на 95% за 28 дней. Что касается восстановления функции печени, V группа показала значительное снижение уровня аланинаминотрансферазы (АЛТ) в сыворотке по сравнению с II группой. У животных IV группы также наблюдалось существенное снижение уровня АЛТ через 15 дней, который, однако, повысился через 30 дней и был аналогичным значениям этого показателя в II группе. Вероятно, этот факт был вызван только кратковременным эффектом инъекции гепатоцитов. Характер изменения сывороточного белка, лактата, альбумина, фибриногена и общего билирубина был аналогичен изменению динамики АЛТ. Продолжительность жизни животных оказалась значительно больше в V группе. Полученные результаты показали возможные способности ВПМНТ в качестве матрикса для гепатоцитов с целью поддержки гепатоцеллюлярного метаболизма. В целом, проведенное исследование показывает, как «вспомогательная печень» путем имплантации культивированных гепатоцитов в ВПМНТ замещает функции поврежденной печени без необходимости замены всей печени.

The aim of this study was to explore the in vivo applicability of intracorporeal constructions with hepatocytes cultured in the fiber TiNi-based scaffold (FTNS). We also sought to determine whether application of hepatocytes cultured in the FTNS was superior to simple hepatocyte injection in terms of restoration of liver functions and survival time in a CCl4-induced hepatitis rat model. In investigation 200 animals were assigned to explore the experimental groups as follows: Group I – control; Group II – animals with CCl4-induced hepatitis; Group III – animals with toxic hepatitis followed by implantation of cell-free FTNS (sham-surgery); Group IV – animals with toxic hepatitis followed by infusion of hepatocytes only (20 × 106 cells/ml); Group V – animals with toxic hepatitis followed by implantation of hepatocytes cultured in the FTNS. In terms of restoration of liver function, Group V showed a significant reduction of serum alanine aminotransferase level compared to Group II. Group IV also showed a significant decrease in ALT level at 15 days. However, the level of ALT increased at 30 days, and the level was similar with results of the Group II. This probably was caused by a short-term effect of hepatocyte injection only. The change patterns of serum protein, lactate, albumin, fibrinogen, and total bilirubin levels were similar to the results of ALT. The survival time of animals was significantly longer in Group V. These findings showed possible abilities of the FTNS as a scaffold to support the hepatocellular metabolism. Using 12 animals, image analysis of SEM data of in vivo hepatocyte evolution in the FTNS was carried out. In the SEM analysis, hepatocytes demonstrated good adhesion and proliferation in the pore space of the FTNS. Moreover, mature tissue comprising both colloidal and fibrous components filled the pore body by 95% in 28 days. Overall, this study sheds a light on how the implantable «auxiliary liver» by engrafting the cultured FTNS substitutes the missing hepatic function without the need to replace the whole liver.

биосовместимостьтканевая инженерияскаффолд из волокнисто-проницаемого никелида титанаCCl4-индуцированный циррозаллогенные гепатоцитырегенеративная терапия печениbiocompatibilitycell tissue engineeringfiber TiNi-based alloy scaffoldCCl4-induced cirrhosisallogenic hepatocytesregenerative liver therapyReferencesГотье С.В., Шагидулин М.Ю., Онищенко Н.А. и др. Коррекция хронической печеночной недостаточности при трансплантации клеток печени в виде суспензии и клеточно-инженерных конструкций (экспериментальное исследование) // Вестник РАМН. 2013. № 4. С. 44–51.Gautier S.V., Shagidulin M.Yu., Onishchenko N.A. et al. Korrekciya hronicheskoy pechenochnoy nedostatochnosti pri transplantatsii kletok pecheni v vide suspenzii i kletochno-inzhenernyh konstrukciy (eksperimental'noye issledovaniye) [Correction of cronic liver failure by transplantation of liver cells suspension and cellengineering designs (experimental investigation)]. Vestnik RAMN – Annals of the Russian Academy of Medical Sciences. 2013;4: 44-51 (In Russ.).Конопля А.И., Литвинова Е.С., Быстрова Н.А. и др. Иммунометаболические нарушения при экспериментальном остром токсическом поражении печени: коррекция ксеногенными и аллогенными гепатоцитами // Вестник трансплантологии и искусственных органов. 2016. Т. 18, № 2. С. 91–98.Konoplya A.I., Litvinova Ye.S., Bystrova N.A. et al. Immunometabolicheskiye narusheniya pri eksperimental'nom ostrom toksicheskom porazhenii pecheni: korrektsiya ksenogennymi i allogennymi gepatotsitami [Immune and metabolic disturbances in experimental acute toxic hepatitis: correction by xenogenic and allogenic hepatocytes]. Vestnik transplantologii i iskusstvennyh organov – Russian Journal of Transplantology and Artificial Organs. 2016;18(2):91-98 (In Russ.).Плеханов А.Н., Товаршинов А.И. Современные подходы к диагностике и лечению печеночной недостаточности (обзор литературы) // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. 2016. Т. 1, № 4 (110). С. 156–161.Plekhanov A.N., Tovarshinov A.I. Sovremennyye podhody k diagnostike i lecheniyu pechenochnoy nedostatochnosti (obzor literatury) [Current approach to diagnosis and treatment for liver failure (literature review)]. Acta Bimedica Scientifica. 2016;1(4):156-161 (In Russ.)].Мельникова Е.В., Меркулова О.В., Борисевич И.В., Меркулов В.А. От клеточных технологий к биомедицинским клеточным продуктам: опыт использования препаратов на основе жизнеспособных клеток человека в Российской Федерации // Цитология. 2018. Т. 60, № 4. С. 231–240.Melnikova Ye.V., Merkulova O.V., Borisevich I.V., Merkulov V.A. Ot kletochnyh tehnologiy k biomeditsinskim kletochnym produktam: opyt ispol'zovaniya preparatov na osnove zhiznesposobnyh kletok cheloveka v Rossiyskoy Federacii [From cellular technologies to biomedical cell products: practice in the use of drugs based on viable human cells in the Russian Federation]. Citologiya – Cytology. 2018;60(4):231-240 (In Russ.).Гулай Ю.С., Крашенинников М.Е., Шагидулин М.Ю., Онищенко Н.А. Тканевая инженерия печени (современное состояние проблемы по данным зарубежных источников) // Вестник трансплантологии и искусственных органов. 2014. Т. 16, № 2. С. 103–113.Gulay Yu.S., Krasheninnikov M.Ye., Shagidulin M.Yu., Onishchenko N.A. Tkanevaya inzheneriya pecheni (sovremennoye sostoyaniye problemy po dannym zarubezhnyh istochnikov [Tissue engineering of the liver (current state of the problem according to foreign sources)]. Vestnik transplantologii i iskusstvennyh organov – Russian Journal of Transplantology and Artificial Organs. 2014; 16(2):103-113 (In Russ.).Арсентьева Н.И., Макарова М.А., Арсентьева М.Л. Разработка клеточных биотехнологий и опыт их применения при патологиях в эксперименте // Бюллетень ВСНЦ CО РАМН. 2015. № 3 (103). С. 79–84.Arsentyeva N.I., Makarova M.A., Arsentyeva M.L. Razrabotka kletochnyh biotehnologiy i opyt ih primeneniya pri patologiyah v eksperimente [Development of cell technologies and our experience of using them at the pathologies in experiment]. Acta Bimedica Scientifica. 2015;3(103):79-84 (In Russ.).Шагидулин М.Ю. Разработка и экспериментальное исследование клеточно-инженерных конструкций печени для лечения печеночной недостаточности: дис. … д-ра мед. наук. М., 2015. 268 с.Shagidulin M.Yu. Razrabotka i eksperimental'noye issledovaniye kletochno-inzhenernyh konstrukciy pecheni dlya lecheniya pechenochnoy nedostatochnosti: Dis. d-ra med. nauk [Development and experimental study of cell-engineered structures of the liver for the treatment of liver failure. Diss. Dr. med. Sci.]. Moscow, 2015. 268 р. (in Russ)].Резник О.Н., Кузьмин Д.О., Скворцов А.Е., Резник А.О. Биобанки – неоценимый ресурс трансплантации. История, современное состояние, перспективы // Вестник трансплантологии и искусственных органов. 2016. Т. 18, № 4. С. 123–132.Reznik O.N., Kuzmin D.O., Skvortsov A.Ye., Reznik A.O. Biobanki – neotsenimyi resurs transplantatsii. Istoriya, sovremennoye sostoyaniye, perspektivy [Biobanks are an essential tool for transplantation. history, current state, perspectives]. Vestnik transplantologii i iskusstvennyh organov – Russian Journal of Transplantology and Artificial Organs. 2016;18(4):123-132 (In Russ.).Kundu J. Approaches to cell delivery: substrates and scaffolds for cell therapy // Dev. Ophthalmol. 2014. Vol. 53. P. 143–154.Kundu J. Approaches to cell delivery: substrates and scaffolds for cell therapy. Dev. Ophthalmol. 2014;53: 143-Готье С.В., Шагидулин М.Ю., Онищенко Н.А. и др. Влияние природы матрикса на функциональную эффективность биомедицинского клеточного продукта для регенерации поврежденной печени (экспериментальная модель острой печеночной недостаточности) // Вестник трансплантологии и искусственных органов. 2017. Т. 19, № 2. С. 78–89.Готье С.В., Шагидулин М.Ю., Онищенко Н.А. и др. Влияние природы матрикса на функциональную эффективность биомедицинского клеточного продукта для регенерации поврежденной печени (экспериментальная модель острой печеночной недостаточности) // Вестник трансплантологии и искусственных органов. 2017. Т. 19, № 2. С. 78–89.Kasuya J. Microporous membrane-based liver tissue engineering for the reconstruction of three-dimensional functional liver tissues in vitro // Biomaterial. 2012. Vol. 2(4). P. 290–295.Gautier S.V., Shagidulin M.Yu., Onishchenko N.A. et al. Vliyaniye prirody matriksa na funktsional’nuyu effektivnost’ biomeditscinskogo kletochnogo produkta dlya regeneratsii povrezhdennoy pecheni (eksperimental’naya model’ ostroy pechenochnoy nedostatochnosti) [Influence of matrix nature on the functional efficiency of a biomedical cell product for the regeneration of damaged liver (experimental model of acute liver failure)]. Vestnik transplantologii i iskusstvennyh organov – Russian Journal of Transplantology and Artificial Organs. 2017;19(2):78-89 (In Russ.).Грицай Д.В., Лебединский А.С., Оченашко О.В. и др. Трансплантация криоконсервированных клеток фетальной печени, заселенных на макропористые альгинат-желатиновые матрицы, крысам с печеночной недостаточностью // Вестник трансплантологии и искусственных органов. 2015. Т. 17, №3. С. 50–57.Kasuya J. Microporous membrane-based liver tissue engineering for the reconstruction of three-dimensional functional liver tissues in vitro. Biomaterial. 2012; 2(4):290-295.Layek B. Cell Penetrating Peptide Conjugated Chitosan for Enhanced Delivery of Nucleic Acid // Int. J. Mol. Sci. 2015. Vol. 4, No. 16 (12). P. 28912–28930.Grizay D.V., Lebedinsky A.S., Ochenashko O.V. et al. Transplantatsiya kriokonservirovannyh kletok fetalnoy pecheni, zaselennyh na makroporistye alginate-zhelatinovye matricy, krysam s pechenochnoy nedostatochnost'yu [Transplantation of cryopreserved fetal liver cells seeded into macroporous alginate-gelatin scaffolds in rats with liver failure]. Vestnik transplantologii i iskusstvennyh organov – Russian Journal of Transplantology and Artificial Organs. 2015;17(3):50-57 (In Russ.).Скалецкая Г.Н. Экспериментальная модель тканеинженерной конструкции поджелудочной железы: дис. … канд. мед. наук. М., 2017. 127 c.Layek B. Cell Penetrating Peptide Conjugated Chitosan for Enhanced Delivery of Nucleic Acid. Int. J. Mol. Sci. 2015;4;16 (12); 28912-28930.Иванов А.Н., Норкин И.А., Пучиньян Д.М. Возможности и перспективы использования скаффолдтехнологий для регенерации костной ткани. Цитология. 2014. Т. 56, № 8. C. 543–548.Skaletskaya G.N. Eksperimental'naya model' tkaneinzhenernoy konstrukcii podzheludochnoy zhelezy. Dis. … kand. med. nauk [Experimental model of the tissue-engineering structure of the pancreas: Diss. … Cand. Med. sci.]. Moscow, 2017. 127 р. (in Russ).Gao Q., Zhu X., Lü Y. et al. Strategies to choose Scaffold materials for Tissue Engineering // Chinese Journal of Biotechnology. 2016. Vol. 32 (2). P. 172–184.Ivanov A.N., Norkin I.A., Puchinyan D.M. Vozmozhnosti i perspektivy ispol'zovaniya scaffold-tekhnologiy dlya regeneracii kostnoy tkani [The possibilities and perspectives of using Scaffold technologies for bone tissue regeneration]. Citologiya – Cytology. 2014;56(8):543-548 (In Russ.).Агапова О.И. Биоинженерные конструкции на основе фиброина шелка и спидроина для регенеративной медицины и тканевой инженерии (обзор) // Современные технологии в медицине. 2017. Т. 9, № 2. С. 190–206.Gao Q., Zhu X., Lü Y. et al. Strategies to choose Scaffold materials for Tissue Engineering. Chinese Journal of Biotechnology. 2016; Feb; 32(2):172-184.Хрыщанович В.Я., Третьяк С.И., Харламова А.Н. Технология микроинкапсуляции при трансплантации тироцитов и паратироцитов без иммуносупрессивной терапии // Весцi Нацыянальнай акадэмii навук Беларусi. Серыя медыцынскiх навук. 2011. № 2. С. 42–48.Agapova O.I. Bioinzhenernyye konstrukcii na osnove fibroina shelka i spidroina dlya regenerativnoy meditsiny i tkanevoy inzhenerii (obzor) [Silk fibroin and spidroin bioengineering constructions for Regenerative Medicine and Tissue Engineering (review)]. Sovremennyye tehnologii v meditsine – Modern Technologies in Medicine. 2017;9(2):190-206 (In Russ.).Хрыщанович В.Я., Третьяк С.И. Сравнительный анализ материалов, применяемых для иммуноизоляции клеток при трансплантации // Новости хирургии. 2012. Т. 20, № 3. С. 100–116.Khryshchanovich V.Ya., Tretiyak S.I., Kharlamova A.N. Tekhnologiya mikroinkapsulyatsii pri transplantatsii tirotsitov i paratirotsitov bez immunosupressivnoy terapii [Microencapsulation technology for transplantation of thyrocytes and parathyrocytes without immunosuppressive therapy]. Vestsi Natsyyanal'noy akademii navuk Belarusi. Seriya medytsynskih navuk – Proceedings of the National Academy of Sciences of Belarus. Medical Series. 2011;2:42-48 (In Russ.).Nagwa El-Badri., Ghoneim M. Mesenchymal Stem Cell Therapy in Diabetes Mellitus: Progress and Challenges // Journal of Nucleic Acids. 2013. Vol. 2013. P. 1–6.Khryshchanovich V.Ya., Tretiyak S.I. Sravnitel'nyi analiz materialov, primenyayemyh dlya immunoizolyacii kletok pri transplantacii [Comparative analysis of materials used for cell immunoisolation during transplantation]. Novosti khirurgii. 2012;20(3):100-116 (In Russ.).Севастьянов В.И. Клеточно-инженерные конструкции в тканевой инженерии и регенеративной медицине // Вестник трансплантологии и искусственных органов. 2015. Т. 17(2). С. 127–130.Nagwa El-Badri., Ghoneim M. Mesenchymal Stem Cell Therapy in Diabetes Mellitus: Progress and Challenges. Journal of Nucleic Acids. 2013;2013:1-6.Хенч Л., Джонс Д. Биоматериалы, искусственные органы и инжиниринг тканей. М.: Техносфера, 2007. 304 с.Sevastyanov V.I. Kletochno-inzhenernyye konstrukcii v tkanevoy inzhenerii i regenerativnoy meditsine [Cell engineering costructions in Tissue Engineering and Regenerative Medicine]. Vestnik transplantologii i iskusstvennyh organov – Russian Journal of Transplantology and Artificial Organs. 2015; 17(2):127-130 (In Russ.).Онищенко Н.А., Гулай Ю.С., Шагидулин М.Ю. и др. Разработка имплантируемых клеточно- и тканеинженерных конструкций вспомогательной печени для лечения печеночной недостаточности // Гены и клетки. 2015. Т. X, № 1. С. 6–17.Khench L., Dzhons D. Biomaterialy, iskusstvennye organy i inzhiniring tkaney [Biomaterials, artificial organs and tissue engineering]. Moscow. Tekhnosfera Publ., 2007. 304 p. (In Russ.).Терещенко В.П., Ларионов П.М., Кирилова И.А. и др. Материалы и методы тканевой инженерии костной ткани // Хирургия позвоночника. – 2016. – Т. 13, №1. – С. 72–81.Onishchenko N.A., Gulay Yu.S., Shagidulin M.Yu. et al. Razrabotka implantiruyemyh kletochno- i tkaneinzhenernyh konstrukciy vspomogatelnoy pecheni dlya lecheniya pechonochnoy nedostatochnosti [Development of implantable cell- and tissue-engineering design of auxiliary liver for the treatment of liver failure]. Genes & Cells. 2015;X(1):6-17 (In Russ.).Гюнтер В.Э., Ходоренко В.Н., Чекалкин Т.Л. и др. Медицинские материалы и имплантаты с памятью формы: в 14 т. Медицинские материалы с памятью формы. Томск: Изд-во МИЦ, 2011. Т. 1.534 с.Tereshchenko V.P., Larionov P.M., Kirilova I.A. et al. Materialy i metody tkanevoy inzhenerii kostnoy tkani [Materials and methods of bone tissue engineering]. Khirurgiya pozvonochnika – Journal of Spine Surgery. 2016;13(1):72-81 (In Russ.).Дамбаев Г.Ц., Гюнтер В.Э., Кокорев О.В. и др. Медицинские материалы и имплантаты с памятью формы: в 14 т. Медицинские материалы с памятью формы. Томск: Изд-во МИЦ. 2012. Т. 11. 398 с.Gunther V.E., Khodorenko V.N., Chekalkin T.L. et al. Medicinskiye materialy i implantaty s pamyat'yu formy:Гюнтер В.Э., Дамбаев Г.Ц., Кокорев О.В. и др. Проницаемый инкубатор из никелида титана: патент РФ № 2638819, МПК A61L 27/56 (200601) № 2016127151; заявл. 5.06.2016; опубл. 15.12.2017, Бюл. 35.v 14 tomah. Meditsinskiye materialy s pamyat'yu formy. T. 1. [Medical materials and shape memory implants: In 14 volumes. Shape memory medical materials. Vol. 1]. Tomsk, MITS Publ., 2011. 534 p. (In Russ.).Hang H.A. et al. Simple isolation and cryopreservation method for adult human hepatocytes // Int. J. Artif. Organs. 2009. Vol. 10, № 32. Р. 720–727.Dambayev G.TS., Gunther V.E., Kokorev O.V. et al. Meditsinskiye materialy i implantaty s pamyat'yu formy: v 14 tomah. Meditsinskiye materialy s pamyat'yu formy. T. 11. [Medical materials and shape memory implants: In 14 volumes. Shape memory medical materials. Vol. 1]. Tomsk, MITS Publ., 2012. 398 p. (In Russ.)].Антюфеева А.А., Лущик М.В. Создание экспериментальных моделей патологических состояний // Международный студенческий научный вестник. 2015. № 2. С. 110–111.Gunther V.E., Dambayev G.Ts., Kokorev О.V. et al. Pronicaemyi incubator iz nikelida titana. Patent RF No. 2638819, MPK A61L 27/56 (200601) No. 2016127151. Date of Publ. 15.12.2017. Bul. 35. (In Russ.).Petrenkо Y.A. Coupling of gelatin to inner surfaces of pore walls in spongy alginate-based scaffolds facilitates the adhesion, growth and differentiation of human bone marrow mesenchymal stromal cells // J. Mater. Sci: Mater Med. 2011. Vol. 22. P. 1529–1540.Hang H.A. et al. Simple isolation and cryopreservation method for adult human hepatocytes. Int. J. Artif. Organs. 2009; 10 (32): 720–727Antyufeyeva A.A., Lushchik M.V. Sozdaniye eksperimentalnyh modeley patologicheskih sostoyaniy [The creation of experimental models of pathological conditions]. Mezhdunarodnyi studencheskiy nauchnyi vestnik – International Student Scientific Bulletin. 2015;2:110-111 (In Russ.).Antyufeyeva A.A., Lushchik M.V. Sozdaniye eksperimentalnyh modeley patologicheskih sostoyaniy [The creation of experimental models of pathological conditions]. Mezhdunarodnyi studencheskiy nauchnyi vestnik – International Student Scientific Bulletin. 2015;2:110-111 (In Russ.).Petrenkо Y.A. Coupling of gelatin to inner surfaces of pore walls in spongy alginate-based scaffolds facilitates the adhesion, growth and differentiation of human bone marrow mesenchymal stromal cells. J. Mater. Sci: Mater Med. 2011; 22: 1529–1540.Petrenkо Y.A. Coupling of gelatin to inner surfaces of pore walls in spongy alginate-based scaffolds facilitates the adhesion, growth and differentiation of human bone marrow mesenchymal stromal cells. J. Mater. Sci: Mater Med. 2011; 22: 1529–1540.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.